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TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (2X Conc.)*1
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1.0 ml × 5
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ROX Reference Dye (50×Conc.)*2
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200 μl × 1
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ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2
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200 μl × 1
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*1 內(nèi)含TaKaRa Ex Taq HS,，dNTP Mixture,，Mg2+，Tli RNaseH,，TB Green,。
*2 ROX Reference Dye是用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。例如使用Applied Biosystems的Real Time PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行實驗就需要校正,。
◆ 需要使用ROX Reference Dye校正的儀器
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II校正的儀器
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要校正的儀器
Thermal Cycler Dice? Real Time System series (Code No. TP700/TP900/TP960)
LightCycler/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
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本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑,。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的最適濃度TB Green，是一種2×濃度的Premix Type試劑,，進(jìn)行實驗時,，PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。
本制品中還添加了Tli RNaseH(耐熱性RNaseH),，以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時,，可以很好地抑制地由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
本制品Buffer經(jīng)過改良,，使反應(yīng)特異性比TB Green Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus)（Code No.RR420A）更高,。能抑制非特異性反應(yīng)，可以在寬廣的范圍內(nèi)進(jìn)行更加準(zhǔn)確的定量,。本Buffer和Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS組合使用,，可以進(jìn)行重復(fù)性好、可信度高的Real Time PCR解析,。
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■ 保存
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4℃可保存6個月,。
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避光保存，避免污染,。
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長期保存請置于-20℃,。產(chǎn)品融解后請于4℃保存，并在6個月內(nèi)用完,。
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■ 注意事項
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1. 使用時請上下顛倒輕輕均勻混合,，避免產(chǎn)生氣泡,，防止因混合不均勻造成的反應(yīng)不足。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻,。
(2) TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (2X conc.)在-20℃存放可能會產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,，可用手握緩慢溶解，于室溫短時間避光放置,，輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失,。
(3) 沉淀會導(dǎo)致溶液成分不均勻，使用前務(wù)必充分混勻試劑,。
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2. 配制PCR反應(yīng)液時,， 試劑請于冰上放置。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,，配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強(qiáng)光照射,。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭,、Microtube等,，盡量避免污染。
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