ImmunoCult?-XF cGMP T細胞擴增培養(yǎng)基重磅上市！

原創(chuàng) STEMCELL STEMCELL 2023-08-02 08:30

免疫細胞治療包括T細胞治療是一種新興的腫瘤治療方法，其可依靠自身的免疫系統(tǒng)靶向并殺傷腫瘤細胞，在臨床治療中取得了顯著的療效。然而，研究人員往往需要在不使用血清的情況下高效獲得和擴增T細胞，因此正確選擇一款無血清、高性能的T細胞擴增培養(yǎng)基便顯得尤為重要。

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為了更好地加速免疫細胞治療臨床轉(zhuǎn)化研究，助力免疫細胞治療產(chǎn)品落地，STEMCELL Technologies重磅推出ImmunoCult?-XF（產(chǎn)品號 #100-0956）cGMP T細胞擴增培養(yǎng)基，無需添加血清或血清衍生物，即可穩(wěn)定大量且高效地擴增人T細胞，并確保高度一致性和可重復性。

經(jīng)過我們不斷地測試與優(yōu)化，使用ImmunoCult?-XF擴增培養(yǎng)的T細胞不會隨著培養(yǎng)時間而顯著改變CD4+和CD8+細胞的原有比例。此外，ImmunoCult?-XF不含酚紅或異種物質(zhì)，并且不添加細胞因子，可提供靈活的工作流程。

使用ImmunoCult?-XF培養(yǎng)T細胞可在10-12天內(nèi)獲得高質(zhì)量的T細胞，并可在重新刺激后產(chǎn)生IFN-γ和IL4等細胞因子。ImmunoCult?-XF也可與ImmunoCult?人CD3/CD28 T細胞激活劑或ImmunoCult?人CD3/CD28/CD2 T細胞激活劑結合使用，通過溫和、無磁珠的方式激活T細胞。

                                    
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1. 更好的T細胞擴增能力和細胞活力

(A)

(B)

圖1. 與其他培養(yǎng)基相比，ImmunoCult?-XF具有相同或更好的T細胞擴增能力

使用EasySep?人T細胞分離試劑盒（產(chǎn)品號 #17951）從人白細胞單采樣本中分離T細胞，通過ImmunoCult?人CD3/CD28/CD2 T細胞激活劑（產(chǎn)品號 #10970）激活，并在添加有人重組 IL-2 (rhIL-2) 的ImmunoCult?-XF培養(yǎng)基或其他商業(yè)培養(yǎng)基中培養(yǎng)。所有其他商業(yè)培養(yǎng)基均根據(jù)各自制造商的說明書制備，并添加人AB血清或血清衍生物。

在不同時間點分析細胞相對于初始細胞密度的倍數(shù)擴增：

從圖1A的結果可以發(fā)現(xiàn)，在ImmunoCult?-XF中培養(yǎng)的T細胞在第5、7和10天分別平均擴增13、106和876倍。
圖1B所示為在第10天分析T細胞相對于初始細胞密度的倍數(shù)擴增以及細胞活力。相較于其他商業(yè)培養(yǎng)基，ImmunoCult?-XF具有相同或更好的T細胞擴增能力，同時保持了T細胞的高活力（第10天存活率>95%）。

2. 穩(wěn)定的CD4+和CD8+細胞比例

圖2. 使用ImmunoCult?-XF擴增培養(yǎng)的T細胞在10天后保持相似的CD4+和CD8+細胞比例

使用EasySep?人T細胞分離試劑盒從人白細胞單采樣本中分離出CD3+ T細胞，用ImmunoCult? 人CD3/CD28/CD2 T細胞激活劑激活，并在添加有rhIL-2的ImmunoCult?-XF培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

圖2所示分別為在0天和第10天收集T細胞，并通過流式細胞術分析表達CD4和CD8的活細胞比例。從流式的結果顯示，使用ImmunoCult?-XF擴增培養(yǎng)的T細胞在10天后保持了相似的CD4+和CD8+細胞比例，表明其不會隨著培養(yǎng)時間而顯著改變CD4+和CD8+細胞的原有比例。

3. 穩(wěn)定的細胞因子表達

圖3.在ImmunoCult?-XF中擴增的T細胞表達細胞內(nèi)IFN-γ、TNF-α和IL-4

使用EasySep?人T細胞分離試劑盒從人白細胞單采樣本中分離T細胞，用ImmunoCult?人CD3/CD28/CD2 T細胞激活劑激活，并在添加有rhIL-2的ImmunoCult?-XF培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在第10天，使用PMA和離子霉素刺激T細胞2小時后添加Brefeldin A，繼續(xù)孵育2小時后收集T細胞并分析細胞內(nèi)IFN-γ、TNF-α和IL-4。

如圖3所示，刺激后CD4+細胞中產(chǎn)生IFN-γ、TNF-α和IL-4，CD8+細胞中產(chǎn)生IFN-γ和TNF-α，而未刺激的對照細胞只有小于0.5%的IFN-γ和TNF-α表達，或小于5%的IL-4表達（數(shù)據(jù)未顯示）。

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