新品上市！eTeSR?提高您的hPSC單細胞傳代標準

原創(chuàng) STEMCELL STEMCELL 2023-11-28 08:31

新品上市！

eTeSR?，一款用于人多能干細胞 (hPSC) 單細胞維持培養(yǎng)和擴增的培養(yǎng)基。

在STEMCELL Technologies，我們的科學家長期以來一直建議將hPSC作為聚集體進行常規(guī)傳代，因為這種方法可以長期擴增多種不同的細胞系，同時保持高細胞質(zhì)量和預期的核型。

隨著越來越多的研究人員將單細胞傳代用于hPSC的日常維持培養(yǎng)，他們發(fā)現(xiàn)這種單細胞傳代的方案簡化了實驗流程，且兼容下游多種應用。盡管具有這些優(yōu)勢，但長期單細胞傳代可能會引起hPSC培養(yǎng)物遺傳不穩(wěn)定等風險，并且一般的實驗室少有嚴格的質(zhì)量控制措施來評估這些hPSC的質(zhì)量。

為了滿足這一需求，我們開發(fā)了eTeSR?培養(yǎng)基，這是一種經(jīng)過優(yōu)化的新型hPSC維持培養(yǎng)基，減少與長期單細胞傳代相關(guān)的細胞應激，可用于常規(guī)hPSC維持培養(yǎng)或特定應用的單細胞培養(yǎng)方案。

eTeSR?培養(yǎng)基的優(yōu)勢：

支持細胞保持高質(zhì)量狀態(tài)，同時通過增強的緩沖體系、關(guān)鍵成分（包括FGF2）的穩(wěn)定性和優(yōu)化的代謝物允許靈活換液
增加細胞得率，同時減少日常維持培養(yǎng)期間與單細胞傳代或細胞高密度相關(guān)的壓力
使用兼容的基因編輯、克隆、分化和凍存方案完成您的工作流程
消除細胞自發(fā)性分化

eTeSR?與每日換液及間隔換液（restricted feeding）的培養(yǎng)方案兼容，同時能保持高細胞質(zhì)量和同等表現(xiàn)性能，此外還可與各種細胞培養(yǎng)基質(zhì)一起使用，包括Corning? Matrigel?hESC-Qualified Matrix和CellAdhere? Laminin-521（產(chǎn)品號 #77003）。

更高的擴增效率

四個hPSC細胞系使用TrypLE?進行單細胞傳代，并在Corning? Matrigel?包被板上使用mTeSR?1、mTeSR? Plus或eTeSR?維持培養(yǎng)。

圖1 單細胞培養(yǎng)的hPSC在eTeSR?中表現(xiàn)出更好的細胞擴增狀態(tài)

細胞維持培養(yǎng)11代，使用mTeSR?1需每日換液，而使用mTeSR? Plus和eTeSR?則采用在第4天和隨后第5天的間隔換液培養(yǎng)方案。通過將每次傳代結(jié)束時的細胞數(shù)除以傳代時接種的細胞數(shù)來計算累積的細胞數(shù)。結(jié)果顯示，在eTeSR?中進行單細胞培養(yǎng)的hPSC擁有更高的細胞擴增效率。

細胞貼壁效率高

細胞接種后24小時，使用Hoechst對來自STiPS-R038的hPSC細胞系染色。將細胞以4.7 x 10⁴個細胞/cm²的密度分別接種到Matrigel?包被的96孔板中，并分別加入含10μM Y-27632的mTeSR?1、mTeSR? Plus或eTeSR?培養(yǎng)基。將培養(yǎng)板固定后，用Hoechst 33342染色，并使用ImageXpress? Micro 4顯微鏡成像。

圖2 hPSC細胞系顯微成像

比較培養(yǎng)在上述3種培養(yǎng)基中的細胞貼壁效率，發(fā)現(xiàn)eTeSR?能提高hPSCs以單細胞接種時的貼壁效率。

更高的遺傳穩(wěn)定性

eTeSR?的配方中加入了包括FGF2在內(nèi)的關(guān)鍵穩(wěn)定成分，提高緩沖能力并優(yōu)化代謝物，從而得到與其他hPSC維持培養(yǎng)基相比具有更高遺傳穩(wěn)定性的高質(zhì)量hPSCs。

圖3 eTeSR?能夠改善hPSC單細胞傳代并長期維持培養(yǎng)的遺傳穩(wěn)定性

當在eTeSR?中培養(yǎng)時，與主要針對聚集體傳代優(yōu)化的培養(yǎng)基相比，單獨克隆的H1和H9 hPSC中檢測到的遺傳變異數(shù)量顯著減少（由hPSC遺傳分析試劑盒檢測），并通過FISH實驗進行了證實。每個方框/正方形代表培養(yǎng)20周（30代）的單個克隆。

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如您想了解更多有關(guān)eTeSR?培養(yǎng)基的詳情，可掃描下方二維碼填寫相關(guān)信息，屆時會有專業(yè)的技術(shù)人員與您聯(lián)系。